近日，中國西醫科學院廣安門病院糖尿病研究室研究人員頒發論文，旨在建立以促甲狀腺激素受體（thyroidstimulatinghormonereceptor，TSHR）A亞單元（TSHR289）基因片段為免疫原的重組腺病毒載體，以期成立Graves病（Gravessdisease，）動物模子，為切磋中藥復方對的防治感化供給前提。研究指出，成功建立了過表達人TSHR289基因的重組腺病毒載體，動物嘗試證明該腺病毒誘發本身免疫，發生TRAb。為下一步體內藥物醫治試驗供給了前提。該文頒發在2014年第04期《重慶醫科大學學報》上。

　　操縱堆疊PCR手藝從pSV2neoECE-TSHR289-6H-dhfr質粒中將目標基因TSHR289擴增至載體attB1-Kozak-TSHR289/6xHis/IRES/eGFP-attB2，瓊脂糖凝膠電泳收受接管，GatewayR手藝建立重組腺病毒載體（pAV.EX1d-TSHR289/6xHis/IRES/eGFP，pAdTSHR289/6xHis），到大腸桿菌Stbl3中，菌落PCR篩選陽性克隆、測序判定。將pAd-TSHR289/6xHis轉染HEK293A細胞包裝腺病毒，CsCl梯度離心法純化腺病毒，TCID50法檢測病毒滴度。RT-PCR法檢測HEK293A中TSHR289的mRNA表達。使用該腺病毒免疫BALB/c小鼠制備模子。

　　菌落PCR篩選陽性克隆，測序證明建立準確；細胞傳染腺病毒后呈現較著細胞病變及加強型綠色熒光卵白（enhancedgreenfluorescentprotein，eGFP）表達；RT-PCR檢測重組腺病毒轉染的細胞中TSHR289的mRNA表達量是未轉染的285倍；嘗試測抱病毒滴度為3.16×1010PFU/ml；BALB/c小鼠免疫第10周T4、TSHR抗體（TRAb）陽性率7/10。

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